Lambda DNA(N6-methyladenine free)

Code No.	製品名	包装単位	希望納入価格
315-00424	Lambda DNA(N6-methyladenine free)	200 µg	9,000円
311-00426	Lambda DNA(N6-methyladenine free)	200 µg×5	36,000円

起源
バクテリオファージλ(cI857Sam7)を溶原化したE.coli(dam-)

M.W.
3.15 x 107Da(48,502bp)

試薬の調製
バクテリオファージλ(cI857Sam7)を溶原菌(dam-)より、塩化セシウム密度勾配遠心により分離し、フェノールでDNAを抽出した。

形状
10 mmol/l Tris-HCl(pH7.9), 1 mmol/l EDTA

濃度
0.2-0.8 µg/µl

純度
A260/A280≒1.8(この値はlotにより多少異なる)

備考
このバクテリオファージは、damメチラーゼの働かないE.coli SK383(dam-)より分離した。damメチラーゼはDNA上の5'-GATC-3'を認識し、アデニンをメチル化するが、E.coli(dam-)でファージを生育させることにより、ファージDNAはメチル化を受けない。このためメチル化によって完全分解が阻害される制限酵素(Bcl I, Mbo I, Cpe I, Dpn II, Xba Iなど)の基質に適している。

　Lambda DNAの制限酵素地図

　Lambda DNAの制限酵素による切断数と認識塩基箇所

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1)Goldberg, A. R. and Howe, M. : Virology, 38, 200(1969)
2)Sanger, F., Coulson, A. R., Hong, G. F., Hill, D. F. and Petersen, G. B. : J. Mol. Biol., 162, 729(1982)
3)Marinus, M. G. and Morris, N. R. : Mutation Research, 28, 15(1975)
4)Marinus, M. G. : Mol. Gen. Genet., 127. 47(1973)

起源	バクテリオファージλ(cI857Sam7)を溶原化したE.coli(dam-)
M.W.	3.15 x 107Da(48,502bp)
試薬の調製	バクテリオファージλ(cI857Sam7)を溶原菌(dam-)より、塩化セシウム密度勾配遠心により分離し、フェノールでDNAを抽出した。
形状	10 mmol/l Tris-HCl(pH7.9), 1 mmol/l EDTA
濃度	0.2-0.8 µg/µl
純度	A260/A280≒1.8(この値はlotにより多少異なる)
備考	このバクテリオファージは、damメチラーゼの働かないE.coli SK383(dam-)より分離した。damメチラーゼはDNA上の5'-GATC-3'を認識し、アデニンをメチル化するが、E.coli(dam-)でファージを生育させることにより、ファージDNAはメチル化を受けない。このためメチル化によって完全分解が阻害される制限酵素(Bcl I, Mbo I, Cpe I, Dpn II, Xba Iなど)の基質に適している。