Alkaline Phosphatase(Calf intestine)

Code No.
包装単位
希望納入価格
319-02661
1,000 units
10,000円

 Alkaline Phosphatase (Calf intestine)は、ほとんどすべてのりん酸モノエステル化合物を脱りん酸化する反応を触媒するが、ジりん酸およびトリりん酸化合物を分解しない。

起源:
Calf intestine
活性:
2〜10units/µl
単位の定義:
Bacterial Alkaline Phosphatase(E.coli A19)参照
形状:
10mmol/l Tris-HCl(pH8.2), 50mmol/l KCl, 1mmol/l MgCl2, 0.1mmol/l ZnCl2, 50% Glycerol
酵素反応条件:

50mmol/l NaCl, 10mmol/l Tris-HCl(pH7.9), 10mmol/l MgCl2, 1mmol/l DTT, 50°C
添付の酵素反応専用バッファー(1m×1本)は酵素反応条件の10倍濃度である。例えば反応容量が50µlの場合には酵素反応専用バッファーを5µl加える。

純度:
本酵素10unitsと1µgのλ/Hind IIIフラグメントを37°Cで16時間反応させても、DNAのアガロースゲル電気泳動パターンに変化は認められない。本酵素10unitsと、2µgの5S rRNAとを37°Cで5時間反応させても、RNAのアガロースゲル電気泳動パターンに変化は認められない。
Bacterial Alkaline Phosphatase(BAP)とAlkaline Phosphatase(Calf intestine)(CIP)の相違
BAP
CIP
由来
大腸菌 仔牛小腸
分子量
約80,000 約100,000
至適pH
8.0 9.8
反応条件
0.1mol/l Trls-HCl(pH8.O)
0.01-01unit/pmol
37°C、2時間
0.01mol/l Tris-HCl(pH7.9)
5'突出末端:0.1unit/mo1*
3'突出末端または平滑末端:1.0unit/pmol*
50°C、60分間
失活の方法
フェノール/クロロホルム処理(数回)
(キレート剤存在下100°Cの加熱で一時的に失活するが、
室温における静置により活性が復活する。)
(1)5mmol/l EDTA存在下て65°C、1時間または75°C、10分間
(2)5mmol/l EDTA、0.5% SDS、100µg/ml Proteinase K存在下で56°C、30分間
(1)または(2)の後、フェノール/クロロホルム処理(数回)

*5kbpのDNA2µgは約14pmol of endsに相当する




Copyright © 2010 NIPPON GENE CO., LTD. All Rights Reserved