Bst DNA Polymerase,　Csa DNA Polymerase,　96-7 DNA Polymerase

Code No.	製品名	包装単位	希望納入価格
311-07481	Bst DNA Polymerase	1,600units	9,000円
319-07281	Csa DNA Polymerase	1,600units	9,000円
319-07301	96-7 DNA Polymerase	1,600units	9,000円
312-07271	dNTPs Mixture (25mM each)	400µl	10,000円

活性	8units/µl
純度	SDS-PAGEによる純度試験で、メインバンドが80%以上で適合とする
品質管理	エンドヌクレアーゼチェック、エキソヌクレアーゼチェック
酵素形状	10mM Tris-HCl (pH 7.5), 1mM DTT, 0.1% Tween 20, 0.1mM EDTA, 50% Glycerol
Unit定義	Bst DNA　Polymerase	1unit は、仔牛胸腺 DNA をプライマー/鋳型として 65℃、30分間に 10nmoles の dNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む活性とする。
	Csa DNA　Polymerase	1unit は、仔牛胸腺 DNA をプライマー/鋳型として 65℃、30分間に 10nmoles の dNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む活性とする。
	96-7 DNA Polymerase	1unit は、仔牛胸腺 DNA をプライマー/鋳型として 55℃、30分間に 10nmoles の dNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む活性とする。

*：酵素原液をそのまま直接熱変性した場合の失活温度

Bst DNA Polymerase

構成	Bst DNA Polymerase (8units /µｌ)	200µl×1本
	10×Bst Reaction Buffer (80mM Mg2+)	500µl×1本

由来：Geobacillus stearothermophilus

Csa DNA Polymerase

構成	Csa DNA Polymerase (8units /µｌ)	200µl×1本
	10×Csa Reaction Buffer (80mM Mg2+)	500µl×1本

96-7 DNA Polymerase

構成	96-7 DNA Polymerase (8units /µｌ）	200µl×1本
	10×96-7 Reaction Buffer (95 mM Mg2+)	500µl×1本

・ 本製品は試験研究用です。
・ Csa DNA Polymerase、96-7 DNA Polymerase及びそれらの生産方法は株式会社ニッポンジーンが特許出願中です。

使用例 1：[Csa DNA Polymerase, 96-7 DNA Polymerase] RCA 法による耐熱性と至適反応温度の評価

RCA法 反応条件	・反応液組成 M13mp18 single strand DNA 20ng Universal primer 50nM dNTPs Mixture 0.25mM each Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃) 20mM KCl 10mM (NH4)2SO4 10mM MgSO4 2mM Tween 20 0.1% DNA Polymerase 8units 全量 20µl ・反応 ：各温度にて30分間
レーン	Ｍ： Gene Ladder Wide 1 (Code No. 313-06961) D ： 鋳型 DNA (M13mp18) single strand DNA
プライマー 配列	Universal Primer : 5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'
備考	0.7% アガロース S / TAE ゲル電気泳動 エチジウムブロマイド染色

使用例 2： [Csa DNA Polymerase, 96-7 DNA Polymerase] LAMP 法への利用^注1

使用例 3： [Bst DNA Polymerase] LAMP 法への利用^注1

反応条件注2	・LAMP法 反応液組成 Candidatus Liberibacter asiaticus DNA 1×106 copies FIP 40pmol BIP 40pmol F3 Primer 5pmol B3 Primer 5pmol Loop Primer F 20pmol Loop Primer B 20pmol dNTPs Mixture 1.4mM each 10×Bst Reaction Buffer 2.5µl Bst DNA Polymerase 8units 全量 25µl ・ 反応　： 65℃、60 分間
レーン	Ｍ： Gene Ladder Wide 1 (Code No. 313-06961) 1 ： A 社 Bst DNA Polymerase 2 ： 当社 Bst DNA Polymerase
プライマー 配列	FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3' BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3' F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3' B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3' Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3' Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'
備考	3.0% アガロース 21 / TAE ゲル電気泳動、エチジウムブロマイド染色

注1: LAMP (Loop-mediated Isothermal Amplification) 法は栄研化学株式会社が特許を保有しています。

注2: Candidatus Liberibacter asiaticus を検出するための LAMP プライマーセットは、先端技術を活用した農林水産研究高度化事業「難防除病害カンキツグリーニング病の拡大阻止技術の開発」において、独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構九州沖縄農業研究センターによって開発されました。

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