T4 DNA Ligase

Code No.	包装単位	希望納入価格
311-00404	50,000 units	9,000円
317-00406	250,000 units	36,000円

T4 DNA Ligaseは、隣接した5'-P末端と3'-OH末端のホスホジエステル結合による、二本鎖DNAどうしの連結反応を触媒する酵素である。

起源：
Escherichia coli lysogen for λ T4-lig phage

活性：
300〜3000units/µl

単位の定義：
1unitは反応混合液20µl中6µlのλ/Hind IIIフラグメントを16°C、60分間で95%以上結合させる酵素活性とする。

形状：
50mmol/l KCl, 10mmol/l Tris-HCl(pH7.5), 0.1mmol/l EDTA, 1mM DTT, 50% Glycerol

酵素反応条件：
50mmol/l Tris-HCl(pH7.9), 10mmol/l MgCl2, 20mmol/l DTT, 1mmol/l ATP, 16°C

添付の酵素反応専用バッファー(1ml×1本)は酵素反応条件の10倍濃度である。例えば反応容量が50µlの場合には酵素反応専用バッファーを5µl加える。

純度：
本酵素1000unitsと1µgのプラスミドpBR322を、16°Cあるいは37°Cで16時間反応させた後、アガロースゲル電気泳動を行った結果、oc-DNAの増加などの変化は認められない。

本酵素1000unitsと1µgのλ/Hind IIIフラグメントをライゲーションが起こらない条件下で16時間反応させた後、アガロースゲル電気泳動を行った結果、DNAフラグメントのパターンに変化は認められなかった。

(1)粘着末端のライゲーション

(左)λ/Hind IIIのライゲーション
T4 DNA Ligase：6units (右)λ/Pst Iのライゲーション
T4 DNA Ligase：6units

(2)平滑末端のライゲーション

(左)λ/Hae IIIのライゲーション
T4 DNA Ligase：6 units (右)λ/Rsa Iのライゲーション
T4 DNA Ligase：6 units

1) Weiss, B., Jacquemin-Sablon, A., Live, T. R., Fareed, G. C. and Richardson, C. C. : J. Biol. Chem., 243, 4543(1968)
2) Murray, N. E., Bruce, S. A. and Murray, K. : J. Mol. Biol., 132, 493(1979)

起源：	Escherichia coli lysogen for λ T4-lig phage
活性：	300〜3000units/µl
単位の定義：	1unitは反応混合液20µl中6µlのλ/Hind IIIフラグメントを16°C、60分間で95%以上結合させる酵素活性とする。
形状：	50mmol/l KCl, 10mmol/l Tris-HCl(pH7.5), 0.1mmol/l EDTA, 1mM DTT, 50% Glycerol
酵素反応条件：	50mmol/l Tris-HCl(pH7.9), 10mmol/l MgCl2, 20mmol/l DTT, 1mmol/l ATP, 16°C
	添付の酵素反応専用バッファー(1ml×1本)は酵素反応条件の10倍濃度である。例えば反応容量が50µlの場合には酵素反応専用バッファーを5µl加える。
純度：	本酵素1000unitsと1µgのプラスミドpBR322を、16°Cあるいは37°Cで16時間反応させた後、アガロースゲル電気泳動を行った結果、oc-DNAの増加などの変化は認められない。
	本酵素1000unitsと1µgのλ/Hind IIIフラグメントをライゲーションが起こらない条件下で16時間反応させた後、アガロースゲル電気泳動を行った結果、DNAフラグメントのパターンに変化は認められなかった。