Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)

真核細胞の mRNA の5'末端には、キャップ（m⁷Gppp）と呼ばれる特徴的構造が存在します。Tobacco Acid Pyrophosphatase（TAP）は、キャップ構造のピロりん酸結合を特異的に開裂する酵素で、本品は高純度に精製されたものです。TAP処理を行うとキャップ構造がはずれ、mRNA の5'末端にりん酸基が残るため、RNAリガ−ゼにより3'末端にOH基を持つ核酸と容易に反応させることができます。

活性 ：	150units/µl
分子量 ：	75kDa
単位の定義 ：	1unitは、37°C、30分間にATPを加水分解し、1nmolの無機りん酸を精製する酵素活性とする。
形状 ：	10mmol/l Tris-HCl (pH6.9), 100mmol/l NaCl, 1mmol/l DTT, 0.1mmol/l EDTA, 0.01% TritonX-100, 50% Glycerol
酵素反応条件 ：	50mmol/l Sodium acetate, 5mmol/l EDTA, 1mmol/l DTT, 37°C

Tobacco Acid Pyrophosphatase (TAP)	1.34µl (200units)
10×TAP Buffer*	100µl

＊10×TAP Bufferは、酵素反応条件の10倍濃度です。本Bufferは凍結保存して下さい。

保存： -20°C

poly(A)⁺ RNA 5µgをDEPC処理水 ～43µl（最終反応容量が50µllになる量）に溶かし、この溶液に10×TAP Buffer 5µl、RNase Inhibitor(40units/µl) 1µl、TAP 200unitsを混ぜた後、37℃、1時間で反応させる。

• 本品を用いたオリゴキャッピング法でのcDNA調製についてはCap Site cDNA調製により確認しておりますが、Cap Site cDNAはオリゴキャッピング法に加えて独自の手法を用いているため、本品はオリゴキャッピング法でのcDNA調製を保証するものではありません。

• 本品は試験研究用試薬ですので、医薬品、その他の目的にはご使用になれません。また、試薬についての基本的な知識のある方以外は取り扱わないで下さい。
  

1.丸山和夫, 菅野純夫：実験医学, 11(18), 2491 (1993)
2.Shinshi, H., Miwa, M., Kato, K., Noguchi, M., Matshushima, T. and Sugimura, T.: Biochemistry, 15(10), 2185 (1976)