METHYL Kit

METHYL Kit はメチル化 DNA 解析用の免疫沈降キットです。
キットは、GenDNA モジュール （DNA 抽出）、メチル化 DNA 免疫沈降モジュール、qPCR モジュールから構成されています。
メチル化 DNA 免疫沈降モジュールには、メチル化 DNA (meDNA) と非メチル化 DNA (unDNA) が含まれており、解析用 DNA サンプルに混合して使用することによって、各免疫沈降すべてにおいてコントロール実験を設定することができ、信頼性のあるデータを得ることができます。

●独自のコントロール実験により信頼性の高いデータが得られます。

●MeDIP, MeDIP on chip で実績の得られている抗5-メチルシチジン抗体が含まれています。

－独自のコントロール実験について－

免疫沈降のコントロールとして、メチル化DNA(meDNA)と非メチル化DNA(unDNA)が含まれています。
断片化後のDNAサンプルとコントロールDNAをミックスして、同一チューブ内で免疫沈降を行うことで、インターナルコントロールをもった免疫沈降を行うことが出来ます。これにより信頼性の高いデータを得ることができます。

	内　容		保存条件
GenDNA モジュール	GenDNA Digestion buffer	3 ml	4℃
	GenDNA Proteinase K (200X)	15 µl	-20℃
	GenDNA precipitant	3 ml	4℃
	GenDNA TE	3 ml	4℃
	GenDNA RNAse (DNAse free)	10 µl	-20℃
メチル化DNA　 免疫沈降 モジュール	meDNA-IP blocked beads	300 µl	4℃(凍結厳禁）
	Water	2 ml	4℃
	Buffer A	300 µl	4℃
	Buffer B	100 µl	4℃
	Buffer C	40 µl	(4℃)/-20℃
	Antibody anti-5meC(3X)	5µl	-20℃/(-80℃)
	Positive meDNA control	20 µl	-20℃
	Negative unDNA control	20 µl	-20℃
	Wash buffer-1	12 ml	4℃
	Wash buffer-2	10 ml	4℃
	Wash buffer-3	10 ml	4℃
	Wash buffer-4	12 ml	4℃
	Buffer D	6 ml	4℃
	Buffer E	1 ml	4℃(常温）
	Buffer F	500µl	4℃
	meDNA-IP TE	5 ml	4℃
	meDNA-IP co-precipitant	100µl	-20℃
	meDNA-IP precipitant	1 ml	4℃
qPCR モジュール	hum meDNA primer pair (AlphaX1)	50 µl	-20℃
	hum unDNA primer pair (GAPDH)	50 µl	-20℃
	meDNA positive control primer pair #1	50 µl	-20℃
	meDNA positive control primer pair #2	50 µl	-20℃
	unDNA negative control primer pair #1	50 µl	-20℃
	unDNA negative control primer pair #2	50 µl	-20℃

【メチル化DNAの検出方法について】

① メチル化感受性　制限酵素による切断法	⇒	DNA配列依存的、多検体処理に適さない。
② MBD法	⇒	DNA配列依存的、特異性が低い。
③ バイサルファイトシークエンス法	⇒	シークエンスを行わなければならない。多検体処理には適さない。
④メチル化DNA免疫沈降法	⇒	メチル化DNAを濃縮するので効率が良い。配列に依存しない。

　METHYL Kit （ニッポンジーン 簡易プロトコール 日本語版）

　METHYL Kit （ニッポンジーン プロトコール 日本語版）

　METHYL Kit （Diagenode社 英語版）

　METHYL Kit Q&A （Diagenode英語版）

　METHYL Kit