pAxCALNLwtit2 DNA/RE Treatment(Cre/loxP System)

Adenovirus Vector Construction Cosmid DNA

　本製品は、アデノウイルスベクター作製用コスミドDNAです。
　本製品で用いている「クローン化ゲノム導入法」は、COS-TPC法よりも簡便で廉価なアデノウイルスベクターの作製法です。

pAxCALNLwtit2 および pAxCANCreit2 は完全長ゲノムDNA導入法をもとに、Cre/loxP発現制御システムを利用して遺伝子発現制御ができるアデノウイルスベクター作製用コスミドDNAです。
目的遺伝子を挿入したpAxCALNLwtit2から作られるアデノウイルスはCreリコンビナーゼを発現するアデノウイルスを共感染させない限り目的遺伝子が発現しないため、細胞毒性を持つ等、目的遺伝子の性質により従来の方法ではアデノウイルスベクター作製が不可能であった遺伝子のアデノウイルス作製に有用です。
また、本コスミドDNAはSwa I処理済みであり、すぐにインサートの導入を行うことができます。

試験研究用試薬です。
医薬品の用途には使用できません。

本コスミドベクターは東京大学 斎藤泉博士らによって開発されました。

• COS-TPC法で必要とされていた親ウイルスDNA(DNA-TPC)を使用しませんので、親ウイルスの産製が抑えられバックグラウンドが低くなります。
• コスミドベクターに直接クローニングできます。シャトルベクターは不要です。
• Swa I処理済みのコスミドDNAであり、すぐにインサートの導入を行うことができます。

クローン化ゲノム導入法について

本製品に目的遺伝子を組み込んだ後、アデノウイルスゲノムに隣接する制限酵素サイト(Nsp Vなど)で切断して293細胞に導入するだけで、目的のアデノウイルスベクターを作製することができる方法です。

ΔE1A·E1B,ΔE3 : アデノウイルス遺伝子の欠失 cos : ラムダファージcos部位 ori : プラスミド複製開始点 Apr : アンピシリン耐性遺伝子

5回分

pAxCALNLwtit2/Swa I 10µg (0.5 µg/µl) pAxCANCreit2/Pac I 10µg (0.5 µg/µl)

大包装は、上記包装が3セットのパッケージとなります。

-20°C

コスミドを導入した大腸菌液をグリセロールストックなどで保存することは避け、DNAとして保存して下さい。 アデノウイルスゲノムやスペーサー部分に欠失が起こり、パッケージングできなくなる可能性があります。

Cosmid DNAの塩基配列

下記のリンクをクリックすると、塩基配列情報(テキストファイル)をダウンロードできます。

• pAxCALNLwtit2 DNA
• pAxCANCreit2 DNA

下のリックをクリックすると製品添付マニュアルがダウンロードされます。閲覧にはPDFを表示できるアプリケーションまたはPDFをブラウザで表示するためのプラグインが必要となります。

[製品添付マニュアル第2版]

• 本品は試験研究用試薬ですので、医薬品、その他の目的にはご使用になれません。また、試薬についての基本的な知識のある方以外は取り扱わないで下さい.
• 本製品を工業目的に使用される場合は、個別にライセンス契約の締結が必要です。
• 本品のお取り扱いは、マニュアル記載内容通りに行って下さい。
• 細胞にトランンスフェクションして得られたアデノウイルスは293細胞以外の細胞では増殖できないため伝播性はありません。 しかし、ヒト、マウス、ラットなどのほとんどの細胞へ感染します。したがって、アデノウイルスを扱う際には、平成 16 年 2 月 19 日に施行された「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」および所属組織における安全管理規定に従い、しかるべき施設で実験を行って下さい 。
• 本製品の平成 16年文部科学省・環境省令1号「研究開発等に係る遺伝子組換え生物等の第二種使用等に当たって執るべき拡散防止措置等を定める省令」に定められる拡散防止措置は、原則 P2 レベルとなります。また、挿入する核酸供与体によってはP3レベルになることもあります。
• マニュアル記載内容と異なったお取り扱いによるトラブルにつきましては、弊社では責任を負いかねます。
• 本品の御使用は日本国内のみに限らせていただきます。海外では特許の関係上、御使用になれませんのでご注意下さい。
• Creリコンビナーゼ発現ウイルス（ AxCANCre ）は力価が上がりにくいため、使用前に精製して下さい。

(1)寺島美保、近藤小貴、鐘ヶ江裕美、斎藤泉：実験医学.21, 931-936.2003
(2)Miyake,S. et al,Proc. Natl Acad.Sci.USA,93:1320-1324,1996
(3)鐘ヶ江裕美、斎藤泉 : 新訂 新遺伝子工学ハンドブック改訂第3版 (村松正実、山本雅) pp202-209, 羊土社, 1999
(4)佐藤友美他 : 遺伝子導入&発現解析実験法 (斎藤泉、菅野純夫、編) pp27-42, 羊土社, 1997
(5)Kanegae,Y. et al. Jpn.J.Med.Sci.Biol., 47, 157-199, 1994
(6)Kanegae, Y. et al. Nucleic Acids Res., 23, 3816-3821, 1995
(7)Kanegae Y et al. Gene,181,207-212,1996
(8)Baba, Y. et al. Microbiol. Immunol., 49, 559-570, 2005

関連製品

Code No.	製品名	包装単位	希望納入価格(円)
311-06141	Swa I	60 units	9,000円
317-06143		60 units×5	29,000円
315-06144		60 units×10	52,000円
312-00912	Nsp V	300 units	9,000円
316-00915		300 units×5	29,000円
314-00916		300 units×10	52,000円
316-90025	TE(pH 8.0)	500 ml	9,000円
313-90091	TE Saturated Phenol	50 ml	9,000円
319-90093		250 ml	13,000円
311-90151	Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol(25 : 24 : 1)	250 ml	15,000円
312-00814	Klenow Fragment	200 units	13,000円
318-00816		200 units×5	52,000円
311-00404	T4 DNA Ligase	50,000 units	9,000円
317-00406		50,000 units×5	36,000円
311-01521	Plasmid Mini Prep Kit	60回分	9,000円
317-01741	LAMBDA INN in vitro packaging Kit	3回分	14,000円

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