①：Ethachinmateで調製したベクターやインサートを使用しても、ライゲーション反応、形質転換への悪影響はありません。
下のグラフは20μlの反応系に2μlのEthachinmateを持ち込んだ場合の結果です。
②：ただし、ライゲーション反応後、すぐにEthachinmateを添加してエタノール沈殿を行うと、形質転換効率が低下しますのでご注意下さい。
③：Ethachinmateでライゲーション産物を回収する場合は、ライゲーション反応後、PCI処理をしてからEthachinmateを加えて下さい。 また、Ethachinmateが反応系に持ち込まれている場合はPCI処理後にエタノール沈殿を行って下さい。 その際、2μl以上のEthachinmateが持ち込まれている場合には、再度Ethachinmateを加える必要はありません。
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pUC19/EcoRⅠ＋500bpインサート。 16℃、5min. 20μlのうち3μlを形質転換に使用。 |