Hi-Competence Broth

Hi-Competence Brothには外来DNAを取り込んだCompetent E. coliの回復や生育を促進する作用がある。
　コンピテント大腸菌のプレパレーションには多価のカチオンが含まれているが、これらのカチオンは本来、大腸菌の成長を阻害する。
　Hi-Competence Brothにはこれを取り除く作用があり、外来DNAを取り込んだ大腸菌の生育を促進する物質を含むため、Hi-Competence Brothを添加することによって、大腸菌の形質転換効率が数倍から数百倍に上昇する。従ってコピー数の少ない遺伝子のクローニングやプラスミドレスキューに利用できる。

-20℃ (-80℃でも保存可能）

① 熱処理を施した大腸菌を別の試験管注1)に移す
② 4倍量のHi-Competence Broth注2)を添加
③ 37°Cにて1 時間振とう
④ 選択培地に塗布注3)
⑤ 37°Cにて一晩静置

• 注1)試験管はなるべく径の大きいものを使用したほうが Hi-Competence Broth の効果が高まる。
• 注2)使用直前に融解し、よく振って一様にした後、あらかじめ37°Cで保温しておく。
• 注3)必要であれば Hi-Competent Broth で希釈する。

≪E. coli JM109のpBR322による形質転換≫

ヒートショック後LB Brothで 培養した後にプレートに塗布したもの	ヒートショック後Hi-Competent Brothで 培養した後にプレートに塗布したもの

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Hara, N. et al. : Nucleic Acids Res., 16, 8727 (1988)