LAMP用GMO検知用試薬(LAMP法)
GMトウモロコシCBH351系統検知用プライマー
| Code No. |
製品名 |
包装単位 |
希望納入価格 |
| 319-06321 |
LAMP用トウモロコシ内在性DNA SSIIbプライマーミックス |
120 µl |
18,800円 |
| 312-06311 |
LAMP用GMトウモロコシ系統別DNA CBH351プライマーミックス |
120 µl |
18,800円 |
GMトウモロコシCBH351系統検知用定性試験用陽性コントロールプラスミド
| Code No. |
製品名 |
包装単位 |
希望納入価格 |
| 315-06301 |
LAMP用GMトウモロコシ系統別DNA CBH351陽性コントロールプラスミド |
50 µl |
12,000 |
使用方法
Step 1 : 反応混合液の準備
例1 : 基本反応系
| Component |
Quantity |
| プライマーミックス(本品) |
2.5 µl |
| Bst DNA Polymerase* |
16 units |
| 10×ThermoPol buffer* |
2.5 µl |
| 2.5 mmol/l each dNTPs |
4.0 µl(final conc. 0.4 mmol/l) |
| 5 mol/l Betaine |
3.2 µl(final conc. 0.64 mol/l) |
| 100 mmol/l MgSO4 |
0.75 µl(final conc. 3.0 mmol/l) |
| H20 |
|
| Total |
22.5 µl |
*反応にはNEW ENGLAND BioLabs社 Bst DNA Polyemrase Large Fragmentおよび添付の反応バッファーの使用を推奨します。
例2 : Loopamp®DNA増幅試薬キット(栄研化学株式会社製)を用いる場合
| Component |
Quantity |
| プライマーミックス(本品) |
2.5 µl |
| 2×Reaction Mix |
12.5 µl |
| Bst DNA Polymerase |
1 µl |
| H20 |
6.5 µl |
| Total |
22.5 µl |
Loopamp® DNA増幅試薬キットに関しましては、添付の製品説明書を十分ご参照の上、ご使用下さい。
Step 2 : 反応
- プライマーミックスを融解させる
- 反応混合液を調製し、反応チューブに22.5 µl分注する。
- サンプルDNAまたはCBH351陽性コントロールプラスミドを2.5 µl添加しよく混合する。
- 検体からのDNA抽出液を100 ng/µlに希釈し、サンプルDNA溶液として用いて下さい。
- 65°C、1時間インキュベートする。
- 反応液を熱処理し(80°、2-5分)酵素を失活させる。
- 反応液2 µlをアガロースゲル(2-3%を推奨)を用いて電気泳動し、増幅の有無を確認する。
使用または取り扱い上の注意
- 本品は、試験研究用試薬ですので、医薬品、その他の目的にはご使用になれません。
- 試薬についての基本的な知識のある方以外は、取り扱わないで下さい。
- LAMP反応は高感度な反応であるためコンタミネーションには十分ご注意下さい。増幅産物等のコンタミネーションを回避するためには可能な限り試薬及びサンプルの調製等はクリーンベンチを使用し、電気泳動などの検出を行う場所はそれ以外の別の場所で行うことをお勧めいたします。
LAMP法は栄研化学株式会社が特許を有しています。株式会社ニッポンジーンは遺伝子組換え食品分野におけるLAMP法の利用に関して、栄研化学株式会社よりライセンスを受けています。
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