<Complete RNA series> GAPDH mRNA, Rat

～RNA の 5' 末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を付加した均質なラット mRNA 標品～

　本品は、ラット glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 遺伝子の全長配列を有する RNA の 5'末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を付加した均質なラット mRNA 標品です。
Real-Time PCR 実験の絶対量コントロールや、バリデーションコントロールを取るためのテンプレートとして用いることが可能です。

・5' 末端に cap 構造を、3' 末端に Poly (A) tail を持ちます。
・単一な遺伝子配列をもつ RNA です。
・世界初の生体内の mRNA を再現した単一の RNA 分子です。
・各種遺伝子発現解析の実験プロトコールの標準化をサポートします。

・ リアルタイム定量 RT-PCR のバリデーションコントロールに！

・ リアルタイム定量 RT-PCR の絶対量コントロールに！

• <Complete RNA series> GAPDH mRNA, Rat [10µl×1本]
• 濃度： 10ng/µl
• 保存条件： －80℃

本製品（ 10⁸ copy ～ 10³ copy 相当量 ) を 遺伝子特異的なプライマーとプローブを用いて 2step リアルタイム定量 PCR を行い、 Standard Curve を作成した 。

反応試薬： qPCR Mastermix Plus Low ROX 　　　　　　　(EUROGENTEC 社製品， 312-80431) 使用機器： ABI PRISM® 7500 Fast 反応条件： Detection ： 蛍光標識プローブ 　　　　　　　Reaction Volume ： 20 µl 　　　　　　　standard 7500 mode （プライマー，プローブ配列は下記に記載）

Cycle Program 95°C 10 min 95°C 15 sec ×40 Cycles 60°C 1 min

Standard Curve Slope Intercept R2 -3.49321 41.05019 0.99981 ⇒　R2＞ 0.99 となり高い定量性を示した。

実験データ1で使用したプライマーおよびプローブ配列

	配列
Forward Primer	5'-TGG CCT CCA AGG AGT AAG AAA C -3'
Reverse Primer	5'-GGC CTC TCT CTT GCT CTC AGT ATC-3'
Double-Dye Probe	5'FAM-CTG GAC CAC CCA GCC CAG CAA-3'TAMRA

＊プライマー，プローブは ニッポンジーン マテリアル にて合成したものを使用しております。
本Primer-Probe配列は、Complete RNAの検量線作成の実験のみに用いるため設計しました。そのため、残存ゲノムDNAを検出しないような領域に設計する考慮はしておりませんので、ご注意ください。

1 2	本製品を、変性アガロースゲルにて電気泳動を行い、純度を確認した。   M： RNA Ladder(0.125 - 6.0 k base) 1µl 1： 本製品 100 ng 2% Agarose S (ホルムアルデヒド変性ゲル）EtBr染色 100V 30min 電気泳動

本製品の配列は、Cap Site cDNA dT Rat Liver を鋳型とした PCR 産物に由来してお ります。
下記のリンクをクリックすると、塩基配列情報 (テキストファイル) をダウンロードで きます。

・<Complete RNA series> GAPDH mRNA, Rat

[備考]　本製品の塩基配列は、〈GenBank〉Accession No,NM_017008 (Version, NM_017008.3) の配列と以下の4箇所が異なります。

1 ・ 6塩基目の 「u」 の後ろに、NM_017008 では 「g」 が存在する。
2 ・ 7 塩基目の 「a」 は、 NM_017008では 「g」 である。
3 ・ 5'側の6塩基および3'側の11塩基は製造上の理由で付加されています。
4 ・ 1283塩基目から約50merの「a」が付加されています。

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