DAp GoldStar® DNA Polymerase

～ Long PCR 用 DNA ポリメラーゼ（Eurogentec社） ～
DAp ⇒ D ifficult A p plications

DAp GoldStar® DNA polymerase は、30kb などの Long PCR が可能なプルーフリーディング活性を有した DNA ポリメラーゼです。
また、GC リッチな DNA を増幅するための専用反応バッファーも添付されており、通常の Taq DNA ポリメラーゼでは増幅が困難な DNA の増幅にも使用することができます。

• 高い伸長活性
• 高効率
• ゲノム DNA から 30kb の増幅が可能
• Taq DNA polymerase よりも 7 倍以上高い精度で増幅
• HISpec buffer 使用により、反応特異性が向上し、 GC リッチ等の PCR 増幅の難しい DNA 増幅にも対応
• 増幅産物は TA クローニングが可能

試薬名	包装単位
DAp GoldStar® DNA polymerase	20 units(5µl)	250 units (62.5µl)
50 mM MgCl2	96µl	1.2ml
10×Reaction Buffer	96µl	1.2ml
5x HI-Spec additive	100µl	1.25ml

【形状】　20mM Tris-HCl(pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% glycerol, 0.5% Nonidet P-40, 0.5% Tween-20
【活性】　4units/µl

λファージゲノム DNA を鋳型とし、 DAp GoldStar® DNA polymerase で約 30kbp の PCR を行った。同時に他社製 Long PCR 用 DNA polymerase との比較を行った。

Method	反応液量	25 µl
	鋳型 DNA	Lambda DNA (250ng/25µl)
	PCR プライマー	final 300 nmol/l each
	酵素量	1.25 units/25µl
	PCR条件	94゜C, 2 min. ↓ [94゜C, 15 sec.→60゜C, 30 sec.→68゜C, 33 min.]×30 Cycles 95゜C, 10 min. ↓ 72゜C, 10 min.

結果	Lane1: Marker 6 Lane2: λ DNA Lane3: 本製品で増幅した産物 Lane4: A 社製品で増幅した産物 Lane5: B 社製品で増幅した産物

上記泳動写真のように、 DAp GoldStar® DNA polymerase を用いて、長鎖 DNA を増幅した場合、他社製 Long PCR 用 DNA polymerase と比較して、同等もしくはそれ以上の効率や特異的な増幅が可能であった。

製品添付マニュアル（英語版）

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