PCR Marker Maker

　PCR Marker Maker(PCRマーカーメーカー)はPCRを行うことによりDNAサイズマーカーを作製するための試薬である。本品は鋳型DNA、プライマー、反応バッファーの混合液で、リコンビナントTaq DNAポリメラーゼ「Gene Taq」を加えるだけですぐにPCRを行うことができ、また、PCRを行う際のポジティブコントロールとしても使用できる。さらに、プライマーを選択することにより、希望のサイズマーカーを得ることができる。

• 鋳型DNA、プライマー、反応バッファーが既に混合されており、リコンビナントTaq DNAポリメラーゼ「Gene Taq」を加えるだけでPCRを行うことができるので、操作が簡便である。

• PCRにより増幅されたDNAはサイズマーカーとなる。

• プライマー(100L、100H、200U、200E)を選択することにより、100〜500 bpまたは600〜1,000 bpの範囲での約100 bp DNAラダー、あるいは100〜1,000bpの範囲での約200 bp DNAラダーの内から、希望のサイズマーカーを得ることができる。

• PCRを行う際のポジティブコントロールにすることができる。

• 本品を用いる際に必要なリコンビナントTaq DNAポリメラーゼ「Gene Taq」を添付しているタイプと添付していないタイプを用意しているので、必要に応じて選択することができる。

• 1回のPCRで約10µgの産物が得られる。

・反応Mixture : 50µl×10本
・Gene Taq : 50units (Gene Taq付のみに添付)

• 本品使用の際の耐熱性DNAポリメラーゼは、リコンビナントTaq DNAポリメラーゼ「Gene Taq」を用いた方がよい。「Gene Taq」以外の耐熱性DNAポリメラーゼを用いた場合、エキストラバンドが現れたり、バンドが消失したりすることがある。
• 使用する増幅装置、あるいは反応条件によって、エキストラバンドが現れたり、バンドが消失したりすることがある。また、収量に差がでることがある。
• 異なる種類の反応Mixtureを混合してPCRを行うと、バンドが消失したり、エキストラバンドが現れたりするので避ける。
• 凍結融解の繰り返しは増幅効果を低下させるため避ける。

[本品により得られるDNA断片の長さ]

各レーンの産物 M Marker 5(φX174/Hinc II) 0.5 µg 1 100L (101 bp, 200 bp, 299 bp, 398 bp, 502 bp) 3 µl 2 100H (601 bp, 702 bp, 800 bp, 906 bp, 1,005 bp) 3 µl 3 200U (101 bp, 299 bp, 502 bp, 702 bp, 906 bp 3 µl 4 200E (200bp, 398 bp, 601 bp, 805 bp, 1,005 bp 3 µl 5 100Lおよび100HによるPCR産物の混合物 各 3 µl

3% Agarose 21
100V 40分間
GeneAmp PCR System 2400 (Perkin-Elmer社製)

反応Mixture1), 50 µl
↓
↓←Gene Taq, 0.5 µl
↓←必要であればミネラルオイルを重層
↓
PCR2)
[94°C 30sec., 55°C 30sec., 72°C 60sec.]×25サイクル3)
↓
電気泳動

1) 本品と異なるPCR用チューブを使用する際には、使用するチューブに移しかえる。本品のチューブを使用する際にはラベルをはがす。
2) 得られたPCR産物は4°Cで約1ヶ月程度保存可能である。
3) このPCRの反応系は「Gene Taq」に適したものである。異なる反応系で使用する場合、できるだけこの反応系に近い条件にする。

Code No.	製品名	包装単位	希望納入価格
318-02871	Gene Taq	250 units	22,500円
314-02873		250 units×4	79,000円

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