qPCRシリーズ

　qPCRシリーズは、ヒートブロック方式のサーマルサイクラーに対応したQuantitative PCR用試薬です。

• ホットスタートPCRが可能なHOTGoldstar™ DNA Polymeraseを採用しており、特異性・感度の高いPCRを実現します。
• 内部標準としてROX Passive referenceを含んでいるので、試薬分注の誤差によるサンプル間のデータのバラツキを補正できます(ROX Passive referenceを含んでいないものもございます)。
• 蛍光標識プローブ用、SYBR® Green I 用に最適化された製品をラインナップしております。

qPCR Mastermix

2×Reaction buffer	1.5 ml×5本	形状：HOTGoldstar™ DNA polymerase, ROX Passive reference, MgCl2(5 mmol/l final conc.),Uracil-N-Glycosylase, dNTP(including dUTP), stablisers
50 mmol/l MgCl2	1.5 ml×1本

SYBR® Green I の場合、上記に加えて以下の試薬が含まれます。

SYBR® Green I(10,000 fold stock solution)	0.5 µl×1本
DMSO SYBR® Dilution buffer	1 ml×1本

●実験例1：ダイズ内在性遺伝子レクチン(Le1)の検出

ABI社GeneAmp® 5700 Sequence Ditection System上で蛍光プローブを用い、異なる初期値のプラスミドDNAから増幅されたダイズ内在性遺伝子レクチン(Le1)を検出した。

(1)：EUROGENTEC社製qPCR Mastermix	(2)：A社製Master Mix(ホットスタート)
(3)：上記の(1)、(2)の結果から作成した検量線
	(Threshold値：0.095) (青)EUROGENTEC社製qPCR Mastermix (赤)A社製Master Mix(ホットスタート)

 

●実験例2：トウモロコシ内在性遺伝子スターチシンターゼIIb (SSIIb)の検出

ABI社GeneAmp® 5700 Sequence Ditection System上で蛍光プローブを用い、異なる初期値のプラスミドDNAから増幅されたトウモロコシ内在性遺伝子スターチシンターゼIIb(SSIIb)を検出した。

(1)：EUROGENTEC社製qPCR Mastermix	(2)：A社製Master Mix(ホットスタート)
(3)：上記の(1)、(2)の結果から作成した検量線
	(Threshold値：0.033) (青)EUROGENTEC社製qPCR Mastermix (赤)A社製Master Mix(ホットスタート)

 

●実験例3 Human β-actin遺伝子の検出

ABI社GeneAmp® 5700 Sequence Ditection System上でSYBR® Green Iを用い、異なる初期値のヒトゲノムDNAから増幅されたβ-actin遺伝子を検出した。

(1)：EUROGENTEC社製qPCR Mastermix	(2)：A社製Master Mix(ホットスタート)
(3)：上記の(1)、(2)の結果から作成した検量線
	(Threshold値：0.02) (青)EUROGENTEC社製qPCR Mastermix (赤)A社製Master Mix(ホットスタート)
(4)：(1)増幅産物の融解曲線分析

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