ISOHAIR Jr.

本品は、毛髪や爪からのDNA抽出試薬(ISOHAIR)、PCR用試薬(Gene Taq NT)、アガロースゲル電気泳動用試薬のセットです。

ISOHAIR：カスタム分注可能	PCR用試薬：カスタム分注可能	電気泳動用試薬
・Extraction Buffer ・Enzyme Solution ・Lysis Solution ・Ethachinmate ・3M Sodium Acetate ・TE(pH8.0) 保存 : -20°C	・Gene Taq NT(5 units/µl) ・10×Gene Taq Universal Buffer ・dNTP mixture ・ddH2O ※プライマーは含まれておりません。 保存 : -20°C	・Agarose 21 ・50×TAE ・EtBr Solutiuon ・Loading Buffer 保存 : 室温
		・Marker 4 ・TE(pH 8.0) 保存 : -20°C

納期：受注後(分注量確認後)営業日10日

　ISOHAIR Jr.マニュアル ver 1.2

アルデヒドデヒドロゲナーゼ2遺伝子の遺伝子型決定
PCR法による遺伝子型特異的増幅

3検体のヒトの毛髪からDNAを抽出し、正常型特異的増幅と変異型特異的増幅を行い、アルデヒドデヒドロゲナーゼ2遺伝子の遺伝子型を決定しました。

	Lane1 Marker 5(φX174/Hinc II digest) Lane2 Sample1/Normal Lane3 Sample1/Mutated Lane4 Sample2/Normal Lane5 Sample2/Mutated Lane6 Sample3/Normal Lane7 Sample3/Mutated

アルデヒドデヒドロゲナーゼ2(ALDH2)は、飲酒後エタノールが代謝されてできるアルデヒドを酸化して代謝する酵素です。ALDH2の欠損はALDH2遺伝子の点突然変異によるものと考えられており、対立遺伝子の組み合わせから、正常型ホモ接合体(NN型)、ヘテロ接合体(MN型)、変異型ホモ接合体(MM型)の3種類の遺伝子型が知られています。3種類のうちのどの遺伝子型を持っているかを調べることで、酒に強いか弱いかを判断することができます。正常型ホモ接合体は酒が飲めるタイプ、ヘテロ接合体は飲む事はできるがすぐ顔に出るタイプ、変異型ホモ接合体は全く飲めないタイプです。ALDH2欠損者においては、飲酒後、血中アセトアルデヒド濃度の上昇により、フラッシング反応(顔面紅潮、動悸、悪心、低血圧等)が見られます。この実験例では、Sample1がNN型、Sample2がMN型、Sample3がMM型であることが分かりました。

プライマー配列、PCR条件はこちらの「プロトコル集 : (6)ISOHAIR実験例　アルデヒドデヒドロゲナーゼ2遺伝子の遺伝子型決定」をご覧下さい。

ISOHAIR Jr.に含まれる製品の紹介

ISOHAIR	1)一般的な生体の組織と異なり、痛みを伴わずだれでも簡単に入手可能な"毛髪"や"爪"からDNAを抽出できます。 2)約30分で試料を溶解でき、フェノール処理、エタノール沈澱まで含めて約１時間でDNAを得られます。
Ethachinmate	1)微量核酸の回収が可能であり、20ng/ml以上のDNA(>100bp)、RNA(>120base)を定量的に回収できます。 2)-20°Cあるいは-80°Cのインキュベーションは不要なので、アルコール添加後直ちに遠心でき、アルコール沈澱に要する時間を短縮できます。 3)回収した核酸は水やバッファーに容易に溶けます。しかも、混在するEthachinmateは酵素反応を全く阻害しません。 4)Ethachinmate自身がアルコールによって沈澱を形成するので、微量な核酸の場合でも沈澱を目で確認でき、大切な試料を洗い流してしまう心配がありません。
Agarose 21	1,000 bp以下の核酸分離に適したアガロースです。非常に溶解性に優れています。

・ ISOHAIR
・ Phenol/Chloroform/Isoamyl alcohol(25:24:1)
・ TE Saturated Phenol
・ 3M Sodium Acetate
・ Ethachinmate
・ TE(pH 8.0)
・ Gene Taq NT
・ Distilled Water, Deionized, Sterile
・ Agarose 21
・ 50 x TAE
・ EtBr Solution
・ Loading Buffer
・ Marker 4