Control siRNA duplexシリーズ


製品一覧表
コードNo. 品名 容量 希望納入価格
319-05841 Control siRNA duplex, Human β-actin 5 nmol
20,000円
316-05851 Control siRNA duplex, Human NuMA 5 nmol
20,000円
313-05861 Control siRNA duplex, Human cdk1 5 nmol
20,000円
310-05871 Control siRNA duplex, Human Eg-5 5 nmol
20,000円
317-05881 Control siRNA duplex, Human Lamin A/C 5 nmol
20,000円
314-05891 Control siRNA duplex, Human Lamin B1 5 nmol
20,000円
317-05901 Control siRNA duplex, Human Vimentin 5 nmol
20,000円
314-05911 Control siRNA duplex, Jellyfish GFP 5 nmol
20,000円
311-05921 Control siRNA duplex, Firefly Luciferase GL2 5 nmol
20,000円
318-05931 Control siRNA duplex, Firefly Luciferase GL3 5 nmol
20,000円

特長

実験例

 1×105個のHeLa細胞に対して、0.10µgのGFP発現ベクター(pEGFP-N1)と20pmoleのControl siRNA duplex, Jellyfish GFPをリポフェクション試薬にて同時導入し、3日間培養した後、蛍光顕微鏡で観察した(実験1)。また、同時に各種対照実験も行った(実験2〜5)。

実験1 実験2 実験3 実験4 実験5
光っていない 光っている 光っている 光っている 光っている

結果

 実験1ではGFP蛍光が観察されなかった。それに対して、実験2〜4の対照実験では、全て蛍光が観察された。これにより、RNAiに対する二本鎖siRNAの有効性が確認された。
 また、実験5でGFP蛍光が観察されたことから、RNAiには遺伝子特異的なsiRNAが必要である事が確認された。

実験例2

1×105個のNIH3T3、COS-1細胞に対して、pGL3-control(1µg)、pRL(0.1µg)、"Control siRNA duplex, Firefly Luciferase GL3"(final 25 nmol/l, 2.5nmol/l, 0.25 nmol/l)をリポフェクション法を用いて同時導入し、24時間後にLuciferase活性を測定してRNAi効果を確認した。

NIH3T3(Mouse) COS-1(Monkey)
Controlの発現量を1とすると、25nM、2.5nMでは0.1未満、0.25nMでは0.1程度になっている Controlの発現量を1とすると、25nM、2.5nMでは0.1未満、0.25nMでは0.1程度になっている
  • 1 : Control (H2O)
  • 2 : siRNA (25 nmol/l)
  • 3 : siRNA (2.5 nmol/l)
  • 4 : siRNA (0.25 nmol/l)

 

実験例3

1×105個のHeLa細胞に対して、pGL3-control(1µg)、pRL-TK(0.1µg)、"Control siRNA duplex, Firefly Luciferase GL3"(final 25 nmol/l)、"Control siRNA sense"(final 25 nmol/l)、"Control siRNA antisense"(final 25 nmol/l)、"Control siRNA duplex, Jellyfish GFP"(final 25 nmol/l)をリポフェクション法を用いて同時導入し、24時間後にLuciferase活性を測定してRNAi効果を確認した。

HeLa(Human)
Controlの発現量を1とすると、Senseのみだと0.7程度、Antisenseのみだと0.3程度、duplexだと0.1未満になる。GFPのduplexを入れてもルシフェラーゼの発現量は減らない。
  • 1 : Control (H2O)
  • 2 : siRNA sense (25 nmol/l)
  • 3 : siRNA antisense (25 nmol/l)
  • 4 : siRNA duplex (25 nmol/l)
  • 5 : siRNA duplex GFP (25 nmol/l)

 

参考文献

  1. Harborth, J., Elbashir, SM., Bechert, K., Tuschl, T. and Weber, K.(2001). J. Cell. Sci. 114, 4557-65.
  2. Caplen, NJ., Parrish, S., Imani, F., Fire, A. and Morgan, RA.(2001). Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98, 9742-47.
  3. Elbashir, SM., Harborth, J., Lendeckel, W., Yalcin, A., Weber, K. and Tuschl, T.(2001). Nature(London). 411, 494-8.

本製品はEUROGENTEC社で合成したsiRNAを原料に、ニッポンジーンで製品化を行っています。


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