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製品説明

Charomid DNA は、λファージベクターの高いクローン化効率を保持しながら、クローン化可能な9 つの制限酵素切断部位を持ち、さらにプラスミドベクターへのサブクローン化を行わずに、Charomidベクター上のスペーサーフラグメントを除去するだけでサブクローン化できる、という新しいタイプのクローニングベクターです（mapはこちら）。
ニッポンジーンでは、スペーサーフラグメント数が異なる4 種類のCharomid ベクターを用意しています。

4 種類のCharomid ベクター

Charomidベクター	全長 （kbp）	スペーサー （2,047 bp）数	挿入可能なDNAサイズ （kbp）
Charomid 9-20	19.7	7	18～32
Charomid 9-28	27.9	11	10～24
Charomid 9-36	36.0	15	2～16
Charomid 9-42	42.2	18	0～10

 

起源	Charomid を保持したE. coli DH1
試薬の調製	Charomid を保持したE. coli DH1 より臭化エチジウム一塩化セシウム密度勾配遠心によって分離した。
形状	10 mmol/l Tris-HCl（pH 8.0）, 1 mmol/l EDTA
濃度	0.2 ～ 0.8 μg/μl
純度	A260/A280 ≒ 1.8（この値はlot により多少異なる）
備考	・Charomid ベクターは、Imperial Cancer Research Fund が、その全権利を有するクローニングベクターである。

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製品内容

Charomid 9-20（10 µg）

構成品	容量	保存	備考
Charomid 9-20	10 µg	-20°C

Charomid 9-28（10 µg）

構成品	容量	保存	備考
Charomid 9-28	10 µg	-20°C

Charomid 9-36（10 µg）

構成品	容量	保存	備考
Charomid 9-36	10 µg	-20°C

 

Charomid 9-42（10 µg）

構成品	容量	保存	備考
Charomid 9-42	10 µg	-20°C

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使用例

マルチクローニングサイトの塩基配列

Charomidベクターの基本構造

Charomid DNAの特長および使用例

使用例など詳細については、2005年度版 遺伝子工学用カタログ・マニュアルのp.487～490をご参照ください。
2005年度版　遺伝子工学用カタログ・マニュアル（p.487～490）（PDF）

1. Charomid ベクターの特長
   1）9種類のクローン化部位
   2）パッケージングによる高いクローン化効率
   3）容易なスペーサー除去
2. Charomid 9-36 を用いたクローン化の例
   1）組換え体の調製
   2）テストパッケージング
   3）大腸菌への導入
   4）スクリーニング
3. プロトコール集
   1）DNAの調製
   2）アルカリ変性とアニーリング

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Q & A

なぜプラークではなくコロニーが形成されるのですか？

Charomid DNA は、コスミドベクターと呼ばれるDNAで、アンピシリン耐性遺伝子と、プラスミドベクター由来の複製開始領域をもちます。
また、ファージ粒子にpackagingされるためのCOS領域はありますが、ファージベクターのようにファージを作る遺伝子を持たないため、ファージ粒子の感染で大腸菌内に取り込まれたあとはプラスミドDNAとして大腸菌内で複製しますが、大腸菌を溶菌させることはできません。
したがいまして、感染させた大腸菌をそのまま(指示菌は必要ありません)アンピシリン入りのプレートにひろげるとプレート上にはコロニーが形成されます。
コロニーからは通常のプラスミドを抽出する方法でインサートの入ったCharomid DNAを抽出することができます。 コスミドベクターCharomid DNA は、大きなプラスミドDNAをファージの感染力で大腸菌に取り込ませることができる利点を持ちます。

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資料 Data Sheet

製品マニュアル

• Charomid 9-20　製品説明書（PDF）
• Charomid 9-28　製品説明書（PDF）
• Charomid 9-36　製品説明書（PDF）
• Charomid 9-42　製品説明書（PDF）

SDS(Safety Data Sheet)

• Charomid 9-20　安全データシート（PDF）
• Charomid 9-28　安全データシート（PDF）
• Charomid 9-36　安全データシート（PDF）
• Charomid 9-42　安全データシート（PDF）

技術資料

• 2005年度版 遺伝子工学用カタログ・マニュアル（p.487～490）（PDF）

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関連情報

備考

• 本品は試験研究用試薬です。医薬品の用途には使用しないでください。

参考文献

• Saito, I. and Stark, G. R. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 83, 8664(1986)
• Giulotto, E., Saito, I. and Stark, G. R. : EMBO J., 5, 2115(1986)
• 斉藤　泉 : 実験医学, 6 (4), 70(1988)
• Sambrook, J. et al. : “Molecular Cloning”, A Laboratory Manual, 2nd ed., 3.24(1989)

関連製品

• 制限酵素
• 修飾酵素、ライゲーション

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