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製品説明

LAMP法用プライマーセット ヨーネ菌

本試薬はLoopamp DNA増幅試薬キットと組み合わせてヨーネ菌(Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis)をLAMP法により検出するためのプライマーセットです。

ヨーネ病はウシなどの反芻(すう)動物に間欠性の下痢や乳量の低下などを引き起こす慢性感染症であり、家畜法定伝染病に指定されています。法定検査法のうち、糞便からの分離培養法は信頼性の高い手法とされています。分離培養法において寒天培地に出現したコロニーについてはDNAを抽出してPCR法またはリアルタイムPCR法により、検出、同定が行われています。
一般的にはヨーネ菌に特徴的なDNA配列であるIS900が遺伝子検査に用いられますが、類似菌のst2333株等への交差性が課題とされます。またPCR法またはリアルタイムPCR法が高感度であるとして一般的に使用されていますが、前者はその工程が煩雑であり、コンタミネーションの危険性が高く、また後者は高価な機器や時間を要するため、ヨーネ菌の検出にはより簡便、迅速で精度の高い手法が望まれていました。

本試薬はヨーネ菌を高感度、迅速、簡便に検出する試薬であり、本品に含まれるプライマーセットはヨーネ菌の遺伝子領域内にLAMP法用のプライマーを設計し開発されています。また、LAMP法専用のリアルタイム濁度測定装置あるいはFluorescent Detection Reagent Mapによる蛍光目視検出を用いることにより、検出に電気泳動を必要とせず、DNA増幅反応から検出までを閉鎖系 (同一反応チューブ内) で行うため、検査のコンタミネーションリスクがなく、短時間でヨーネ菌を検出することが可能です。

特長

ヨーネ菌を検出するためのプライマーセット

Loopamp DNA増幅試薬キットと組み合わせて使用し、ヨーネ菌をLAMP法を用いて特異的に検出するためのプライマーセットです。

簡便かつ迅速にヨーネ菌を検出

サンプルと試薬を混合し、一定温度 (66℃) で45分間インキュベーションするだけで、ヨーネ菌を検出することができます。

簡易な検出が可能

増幅反応の副産物であるピロリン酸マグネシウムの濁度を測定することにより、増幅の有無を確認できます。また、蛍光目視検出を行うことも可能です。

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製品内容

LAMP法用プライマーセット ヨーネ菌 （48テスト用）

構成品	容量	保存	備考
Primer Mix Map (PM Map)	125 μl x 1	-20°C（遮光）
Fluorescent Detection Reagent Map (FD Map)	50 μl x 1	-20°C（遮光）
Positive Control Map (PC Map)	100 μl x 1	-20°C（遮光）

輸送方法

株式会社ニッポンジーンでは、ドライアイス梱包で製品をお届けいたします。 納品当日、製品を確実にお受取りいただき、到着次第できるだけ早く－20°Cフリーザーにて保存してください。

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資料 Data Sheet

製品マニュアル

• LAMP法用プライマーセット ヨーネ菌　取扱説明書 (PDF)
  

SDS(Safety Data Sheet)

• LAMP法用プライマーセット ヨーネ菌　製品安全データシート (PDF)
  

リーフレット

• LAMP法用プライマーセット ヨーネ菌　パンフレット(PDF)

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関連情報

備考

• 本品は、LAMP 法を用いてヨーネ菌(Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis)を検出するための試験研究用試薬です。医療行為および臨床診断等の目的では使用できません。
• 本キットに含まれているLAMPプライマーセット及びこのLAMPプライマーセットを用いたLAMP法によるヨーネ菌の検出技術は、地方独立行政法人 北海道立総合研究機構 農業研究本部 畜産試験場と栄研化学株式会社等による共同研究によって開発されました。また、本成果の一部は、国立研究開発法人 科学技術振興機構 研究成果展開事業 研究成果最適展開支援プログラム フィージビリティスタディ ステージ探索タイプ (JST A-step 【FS】) 「現場で使える牛 ヨーネ病の目視判定法の開発」の支援を受けて行われました。
• 本キットに含まれるプライマーは、全て「リライアブル＆トレーサブルオリゴ」を使用しています。「リライアブル＆トレーサブルオリゴ」は、株式会社ニッポンジーンマテリアルが製造する高信頼性オリゴヌクレオチド「リライアブルオリゴ」の一つです。
• LAMP (Loop-mediated Isothermal Amplification) 法は、栄研化学株式会社により開発された日本産の等温遺伝子増幅法です。

参考文献

• 内藤 学、陰山 聡一、藤井 貴志、福田 茂夫、平山 博樹、南橋 昭、鈴木 渉 (2012) 牛糞便培養により分離されたコロニーのLAMP 法によるヨーネ菌同定 家畜感染症学会誌 1 (3): 133
• Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, Yonekawa T, Watanabe K, Amino N, Hase T. (2000) Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Res. 28 (12): e63
• Prince AM, Andrus L. (1992) PCR: how to kill unwanted DNA. Biotechniques. 12 (3): 358

関連製品

• Loopamp DNA 増幅試薬キット LMP204 / LMP205 / LMP206（栄研化学株式会社製品）
• Loopamp 反応チューブ LMP901 / LMP905（栄研化学株式会社製品）

問い合わせ先

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