EtBr Solution

臭化エチジウム（核酸染色用試薬）

品名	Code No.	包装単位	価格	備考
EtBr Solution	315-90051	10 ml	10,000円

製造元　(株)ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

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製品説明

本品は臭化エチジウム10 mgを精製滅菌水1 mlで溶解させたものです。危険を伴う臭化エチジウム粉末の精秤や溶解を行う必要がないので、手間を省くことができ安全です。

用途

核酸染色用試薬

使用上の注意

臭化エチジウムは強力な突然変異誘起剤ですので、保存、取り扱いには十分注意して下さい。また、取り扱いの際には使い捨ての手袋を装着して下さい。
廃棄する際は、活性炭などに吸着させ処理して下さい。EtBr Destroyerの使用をお奨めします。

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製品内容

EtBr Solution (10 ml)
構成品	容量	保存	備考
EtBr Solution	10 ml x 1	2～10°C (遮光)	濃度：10 mg/ml　形状：赤色溶液　測定波長：λ ex ＝ 254 nm（第2 ピーク）または518 nm, λ em ＝ 605 nm

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使用例

使用例 1　エチジウムブロミド (EtBr) で後染めした場合

染色液として、EtBr Solution を 0.5 μg/mlに調製した溶液を用意した。 1% Agarose S ゲルにマーカーの Gene Ladder Wide 1 をアプライした。電気泳動後のアガロースゲルを取り出し、染色液の中に10分間沈めて染色し、溶液から取り出したゲルを水の中に30分間沈めて脱色を行った後、写真撮影した。

Gene Ladder Wide1, EtBr Solution 0.5µg/mL 10分染色→30分脱色

使用例 2　エチジウムブロミド (EtBr) で先染めした場合

1％ Agarose S (1X TAE) に染色試薬としてEtBr Solution (終濃度 0.5 μg/ml) を添加してアガロースゲルを作製した。EtBr添加済みのアガロースゲルに Gene Ladder Fast 2 と Gene Ladder 100 をアプライして電気泳動した。

先染めの場合
EtBr入り1％アガロースゲルを作製し、電気泳動100V 30min.

結果

アプライ量が少ないため、Gene Ladder Fast 2 の 500 bpと100 bpのバンドと、Gene Ladder 100 の100 bpと200 bpと300 bpのバンドが見えない。DNA量だけでなく、ゲルの中のEtBrが陰極側に移動することも影響した可能性も考えられた。
Gene Ladder 100 の泳動パターンについて、通常2-3％のアガロースゲルを使用するところを1％ゲルで泳動したため、低分子領域（1 kb以下）のバンド間が狭い。
さらに、Gene Ladder 100 の2 kb と1.4 kbと 1 kb のバンドがにじんでおり、DNAの移動も陽極側に進んでいる。Gene Ladder 100 は低分子側のDNA量が多いラダーマーカーのため、先行する低分子量DNAがEtBrと先に結合することで、ゲル内のEtBrの分布がさらに不均一になることが影響した可能性も考えられた。

先染めの場合、マーカーは「Gene Ladder Fast」のご使用をお勧めします。また、泳動時間を短くするなどお試しください。

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Q & A

使用濃度 0.5 μg/ml にするには、何倍に希釈すればよいですか？: EtBr Solution （10 mg/ml）を20,000倍に希釈します。　100 mlの泳動バッファーに対して、5 µl の EtBr Solution （10 mg/ml）を混ぜると、終濃度 0.5 μg/ml になります。アガロースゲル電気泳動の DNA 染色の場合、終濃度 0.1 μg/ml　でも問題なく使用できます（100 mlバッファーに1 µl添加）。

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