BoostAmp Bst DNA Polymerase

鎖置換型酵素

品名	Code No.	包装単位	価格	備考
BoostAmp Bst DNA Polymerase	312-09731	1,600 units	27,000円

製造元（株）ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

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製品説明

本品は、増幅効率と耐塩性を向上させた改変型Bst DNA Polymeraseです。
DNA ポリメラーゼ活性と鎖置換活性をもつため、LAMP法などの等温増幅法に使用可能です。また、10X Intercalation Mix（別売）と組み合わせることで、LAMP法による核酸増幅を蛍光検出することが可能です。

特長

・優れた増幅効率 →実験例1、2 ・耐塩性が大幅に向上 →実験例3、4 ・10X Intercalation Mix （別売）との組み合わせで、高感度な蛍光検出が可能

用途

鎖置換活性を利用したアプリケーション（等温遺伝子増幅法など）

*Bst* DNA Polymerase
至適反応温度	65°C～ 70°C
失活時間	80°C、5 分間

起源	遺伝子組換え大腸菌
活性	8 units/μl
単位の定義	1 unit は、仔牛胸腺DNA をプライマー/ 鋳型として、65°C、30 分間に10 nmol のdNTP を酸不溶性沈殿物に取り込む酵素活性とする。

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製品内容

BoostAmp *Bst* DNA Polymerase
構成品	容量	保存	備考
BoostAmp Bst DNA Polymerase	1,600 units （200 μl） x 1	-20°C	8 units/μl
5 × BoostAmp Buffer	1 mL x 1	-20°C	5×BoostAmp BufferにdNTPsは含まれておりません。別途dNTPs Mixture（25 mM each）等をご用意下さい。

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使用例

実験例1. LAMP法による増幅効率の比較 (蛍光検出系)

本品（BoostAmp Bst DNA Polymerase）と従来品（野生型 Bst DNA Polymerase、 Code No. 311-07481）およびA社品（改変型 Bst DNA Polymerase）に、10×Intercalation Mix（別売、Code No. 315-09721）、各社酵素反応バッファー、プライマーミックス、 dNTPs、鋳型DNAを混合した反応液を調製し、リアルタイムPCR装置で核酸増幅を行い、蛍光検出しました。

【結果】 本品（BoostAmp Bst DNA Polymerase）は、従来品（野生型 Bst）およびA社品（改変型 Bst）と比較して、増幅曲線の立ち上がりが早く、微量な鋳型DNAにおいても増幅が確認されました。

実験例2. LAMP法による増幅効率の比較 (濁度検出系)

本品（BoostAmp Bst DNA Polymerase）と従来品（野生型 Bst DNA Polymerase、 Code No. 311-07481）およびA社品（改変型 Bst DNA Polymerase）に、各社酵素反応バッファー、プライマーミックス、dNTPs、鋳型DNAを混合した反応液を調製し、濁度測定装置で核酸増幅を行い、Threshold time値（閾値到達時間）を比較しました。

【結果】 本品（BoostAmp Bst DNA Polymerase）は、従来品（野生型 Bst）およびA社品（改変型 Bst）と比較して、増幅曲線の立ち上がりが早く、高い増幅効率を示しました。

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実験例3. 毛根サンプルのアルカリ抽出とLAMP法による核酸増幅（蛍光検出系）

アルカリ溶液で溶解したヒト毛根の上清を鋳型に使用しました（反応系中の Na+ 最終濃度：9 mM）。

【結果】 簡易抽出した毛根サンプルを鋳型とした反応条件では、本品（BoostAmp Bst DNA Polymerase）は、従来品（野生型 Bst）およびA社品（改変型 Bst）に比べて増幅曲線の立ち上がりが早く、高い増幅効率と優れた耐塩性を示しました。

実験例4. 耐塩性の評価

反応系中の KCl 最終濃度が 0 mM、20 mM、40 mM、60 mM、80 mM、100 mMになるようにした条件で、増幅効率を比較しました。

【結果】 　KClの最終濃度を 20 mM とした反応条件では、本品（BoostAmp Bst DNA Polymerase）は、KClを添加していない条件と同等の増幅効率を示しました。
　また、KClの最終濃度を 40 mM、60 mM とした反応条件では、本品（BoostAmp Bst）は、従来品（野生型 Bst）およびA社品（改変型 Bst）に比べて明らかに増幅曲線の立ち上がりが早く、高い増幅効率を示しました。
　さらに、KClの最終濃度が 80 mM 以上という厳しい条件下では、他社品では増幅が確認されなかったのに対し、本品では増幅が認められました。

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