ISOSPIN Liquid Sample miRNA

液体試料からの small RNA 精製キット
核酸抽出/精製
品名 Code No. 包装単位 価格 備考
ISOSPIN Liquid Sample miRNA 318-09191 50回用 45,000円  

製造元 (株)ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

製品説明


ISOSPIN Liquid Sample miRNA(アイソスピン リキッドサンプル マイクロRNA)は、液体試料からmicro RNA (miRNA) などのsmall RNAを精製するためのキットです。フェノールやクロロホルムを使用せず、カラム精製や遠心操作によりDNAや高分子RNAを除くことによりsmall RNA を濃縮することができます。

抽出実績(液体試料):

特長

・液体試料からsmall RNAを効率よく精製・フェノールやクロロホルム等の毒劇物を使用しない・DNaseを使用せず、ゲノムDNAを除去可能


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製品内容

ISOSPIN Liquid Sample miRNA (50回用)
構成品 容量 保存 備考
Proteinase K (20 mg/ml) 1 ml x 1本 -20°C  
LR Extraction Buffer 18 ml x 1本 室温  
LR Wash1 Buffer 60 ml x 1本 室温 エタノール含有
LR Wash2 Buffer 60 ml x 1本 室温 エタノール含有
ddWater (RNase free) 1 ml x 5本 室温  
Spin Column 50本 x 1袋 室温 上部パーツ:カラム、下部パーツ:Collection Tube
Spin Column Blue 50本 x 1袋 室温 上部パーツ:カラム、下部パーツ:Collection Tube

輸送方法

製品は室温輸送しております。製品到着後、キット構成品のProteinase Kを冷凍保存(-20℃)して下さい。

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使用例

※血漿、血清などlarge RNAが含まれない試料の場合、Step 2(large RNAの除去)を省略できます。


Data 1. 全血からのsmall RNA 精製

ISOSPIN Liquid Sample miRNAを用いて全血180 μl からsmall RNA を精製した。 また、各精製工程(Step1-3) における核酸溶液をアガロースゲル電気泳動に供した。

結果 全血から DNA, large RNA を除去し、 small RNA を選択的に精製できた。

Data 2. 血漿から抽出したmiRNA の検出(リアルタイムPCR)

ISOSPIN Liquid Sample miRNAを用いて180 μl と350 μl の血漿からsmall RNA を抽出した。また、他社品を用いて300 μl の血漿からsmall RNA を抽出した(プロトコールに従いDNase 処理を実施)。各溶出液から3.57 μl のsmall RNA を鋳型にTemplate Switching 逆転写反応でcDNA を合成し、Intercalation 法によるリアルタイムPCR でマイクロRNA のmiR-16 とLet-7a を検出した。

結果 本品を用いて180 μl および350 μl の血漿から抽出した方が、他社品よりも高感度にマイクロRNA を検出することができた。

Data 3. 尿から抽出したmiRNA の検出(リアルタイムPCR)

ISOSPIN Liquid Sample miRNAを用いて180 μl と350 μl の尿からsmall RNA を抽出した。各溶出液から3.57 µlの small RNA を鋳型にTemplate Switching逆転写反応で cDNA を合成し、Intercalation 法によるリアルタイムPCR でマイクロRNA のmiR-16 とLet-7a を検出した。

結果 本品を用いて180 μl および350 μl の尿からマイクロRNA を検出することができた。

Data 4. 血漿から抽出したmiRNAの検出(リアルタイムPCR)

ISOSPIN Liquid Sample miRNAとB社品を用いて血漿からsmall RNAを抽出した。 各キットの溶出液 3.57 μLを用いて逆転写反応を行い、リアルタイムPCR(インターカレーション法)でマイクロRNAのmiR-16とLet-7aを検出した。

プロトコール

図

結果 本品の血漿からのsmall RNA精製プロトコールでは、Let-7aおよびmiR-16の検出において、B社品のオプションプロトコール(DNase処理あり)と同等のCt値が得られた。 本品はゲノムDNAの除去にスピンカラムを用いた効率的な方法を採用しているため、DNaseを使用せず簡便に高純度なmiRNAが得られた。

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Q & A

RNA収量が少ない。
キット以外に必要なものはありますか?
溶出液量を減らすことはできますか?

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資料 Data Sheet

製品マニュアル

SDS(Safety Data Sheet)

リーフレット

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関連情報

備考

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問い合わせ先

購入に関するお問い合わせ先
富士フイルム和光純薬株式会社および同社代理店・特約店
製品に関するお問い合わせ先
株式会社ニッポンジーン 学術営業課

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