GeneAce Turbo RT Kit with DNase I

リアルタイムqPCR解析用 cDNA合成キット
cDNA合成
品名 Code No. 包装単位 価格 備考
GeneAce Turbo RT Kit with DNase I 315-09841 100回用 47,000円  
 

製造元 (株)ニッポンジーン

表示価格は希望納入価格 (税別) です。

製品説明

GeneAce Turbo RT Kit with DNase I は、改変型M-MLV(RNase H-)逆転写酵素により、短時間で大量のcDNAを合成できます。本キットで合成したcDNAは、RT-qPCRにおいて高い定量を示し、RT-qPCR用の鋳型として適しています。さらに、付属のDNase I で、サンプル中のゲノムDNAを簡単に除去できます。

特長

・約25分間でcDNA合成が完了(DNase I処理時間を含む)・微量RNAからも安定したcDNA合成が可能・各種阻害物質に対する高い耐性・リアルタイムPCR試薬(GeneAce qPCR Mix シリーズ)との組み合わせに最適

用途

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製品内容

使用回数

包装単位は20 µl反応系での使用回数です。

GeneAce Turbo RT Kit with DNase I (100回用)
構成品 容量 保存 備考
DNase I (RNase free) 20 µl x 1 -20°C  
14×DN Turbo Buffer 100 µl x 1 -20°C 14×DN Turbo Bufferには逆転写反応に必要な成分が含まれています。
5×RT Turbo Buffer 400 µl x 1 -20°C 5×RT Turbo Bufferの添加によりDNase I活性が停止します。
RT Turbo Primer Mix 100 µl x 1 -20°C RT Turbo Primer Mix は、Random Hexamer と Oligo (dT) Primer を最適な比率で配合したプレミックスです。
Turbo Enzyme Mix 100 µl x 1 -20°C Turbo Enzyme Mix は、改変型 M-MLV Reverse Transcriptase および RNase Inhibitor を含有しています。
ddWater (RNase free) 1.4 ml x 1 -20°C  

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使用例

1.RNAサンプルからgDNAを除去 2.逆転写反応 3.合成cDNAを活用

実験例1 cDNA合成量の比較

Jurkat Total RNA 10 ng または 0.1 ng を用いて各社キットでcDNAを合成した。 GeneAce SYBR™ qPCR Mix II を用いてリアルタイムqPCRを実施し、当社品を100% とする相対cDNA合成量をCt値から算出した。

結果

本キットは、鋳型RNA量 10 ng および 0.1 ng のいずれの条件でも、高いcDNA合成量を示した。


実験例2 阻害物質耐性

Mouse Total RNA(5 ng/µL)を鋳型に、各種阻害物質存在下で各社キットによるcDNA合成を行い、GeneAce SYBR™ qPCR Mix II を用いてリアルタイムqPCRを実施した。本品の阻害物質無添加条件を100%として、各条件の相対cDNA合成量をCt値から算出した。

結果

本品は、複数の阻害物質存在下でも高いcDNA合成性能を維持した。特にSDS存在下では、他社品を大きく上回るcDNA合成量を示した。


実験例3 簡易抽出RNAからのcDNA合成

  1. Jurkat細胞 (105, 104, 103 cells) から、Template Prepper for Cell RNA (Code No. 318-09451) を用いてRNAを簡易抽出し、本品でcDNAを合成した。
  2. 得られたcDNAを鋳型として、GeneAce SYBR™ qPCR Mix II を用いてリアルタイムqPCRを実施した。

結果

簡易抽出RNAを用いた場合でも、本品は定量性の高いcDNA合成を示した。

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Q & A

 
DNase I 処理済みのRNAサンプルを使用します。本キットを用いる場合、DNase I処理工程は省略できますか?
可能です。DNase I 処理を行わない場合、DNase I 以外の試薬を反応系に添加して、逆転写反応を実施してください。

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資料 Data Sheet

製品マニュアル

SDS(Safety Data Sheet)

リーフレット

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関連情報

備考

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問い合わせ先

購入に関するお問い合わせ先
富士フイルム和光純薬株式会社および同社代理店・特約店
製品に関するお問い合わせ先
株式会社ニッポンジーン 企画開発部

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